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液相色譜柱的選擇須結(jié)合自身產(chǎn)品特性

更新時(shí)間:2021-01-26      瀏覽次數(shù):1876
  現(xiàn)代高效液相色譜分析中,液相色譜柱的選擇直接影響了分離效果的好壞,選擇合適的色譜柱可以縮短方法開發(fā)所需的時(shí)間,并且使方法更具穩(wěn)定性。但是現(xiàn)在市場上色譜柱種類繁多,不同類型的色譜柱分離對象不同,因此,要做合適的選擇,必須對此有一定的認(rèn)識(shí)和了解。
 
  在選擇液相色譜柱之前,先多了解自己的樣品和雜質(zhì),他們的類型結(jié)構(gòu)、極性、酸堿性、分子量大小等等。
 
  1.樣品是極性的且弱酸性的;就可以選擇C18在100%酸性水溶液條件下檢測,即要選擇承受100%純水且對極性化合物保留很好的色譜柱。
 
  2.如果樣品極性太強(qiáng),或酸性太強(qiáng);可以選擇CN,NH2,或硅膠柱,HILIC(親水色譜),也有使用C18+強(qiáng)陰離子對試劑或強(qiáng)陰離子交換色譜柱(缺點(diǎn)是離子對試劑平衡時(shí)間長,對流動(dòng)相pH要求比較精密,否則很難重復(fù)實(shí)驗(yàn),另外離子對試劑很難洗下來,基本上用了離子對的色譜柱就不能再用于其它實(shí)驗(yàn))。
 
  3.若樣品是堿性的;可選擇高純硅膠柱(高純硅膠缺少金屬雜質(zhì),且硅膠端基封尾)或一些經(jīng)過修飾的C18柱(如極性嵌入技術(shù)或堿去活技術(shù)等),他們都會(huì)減少堿性化合物的拖尾,一般會(huì)選擇中性或偏堿的條件下做,因?yàn)檫@樣可增加堿性樣品的保留。
 
  4.如果堿性化合物的極性太強(qiáng),或堿性太強(qiáng);可以選擇寬pH的C18色譜柱在高pH值檢測(優(yōu)點(diǎn)是方法開發(fā)簡單,缺點(diǎn)是目前實(shí)現(xiàn)這一技術(shù)的色譜柱品牌比較少,價(jià)格也高)或者選用HILIC色譜柱(硅膠柱在反相條件下使用,這也是很經(jīng)典的檢測堿性樣品的方法)選擇強(qiáng)離子交換柱(缺點(diǎn)是不能用來分析其它樣品,對流動(dòng)相pH要求比較精密,否則很難重復(fù)實(shí)驗(yàn))也有使用C18+強(qiáng)陰離子對試劑或強(qiáng)陰離子交換色譜柱。
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